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DAPI，也称DAPI dihydrochloride，是一种常用的核酸染料，可以和双链DNA富含AT序列的小沟结合，产生比自身强20多倍的蓝色荧光。和EB(ethidium bromide)相比，DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。DAPI也可对RNA进行染色，染色机理是其可以选择性嵌入“AU序列”并发出荧光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358nm/461nm)，DAPI-RNA具有较长的最大发射波长(500nm)，其荧光亮度仅有DAPI-dsDNA的20%。

尽管DAPI不能通过活细胞膜，但可以通过提高浓度使之进入活细胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，Microplasm DNA以及染色体DNA。

DAPI典型的蓝色荧光特性使其非常普遍的搭配其他绿色、黄色或红色荧光染料用于细胞生物学多色荧光标记技术，因此也常作为核酸和染色体的复染剂用于细胞凋亡检测、RNA原位杂交、直接或间接免疫检测等领域，其染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。推荐工作浓度为0.5～10μg/mL。

中文名称	4',6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐
英文名称	2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride;DAPI dihydrochloride 4’,6-Diamidino-2-phenylindole,dihydrochloride
CAS号	28718-90-3
分子式	C16H15N5 ·2HCl
分子量	350.25
纯度	≥95%
荧光光谱	DAPI的Ex/Em=340nm/488nm；DAPI-DNA的Ex/Em=358nm/461nm
结构式

• DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
  
• 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
  
• 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 本制品仅作科研用途！

• 配制工作液：用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作的浓度(0.5～10μg/mL)，工作液可于4℃保存6个月。
  
• 固定的细胞或组织染色：
  对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI染色。
  
  • 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。
    对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3～5分钟。
    
  • 吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2～3次，每次3～5分钟。
    
  • 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm。
• 活细胞或组织染色：
  
  • 细胞培养物中加入适量DAPI染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1mL染色液，对于96孔板一个孔需加入100μL染色液。
    
  • 在37℃培养细胞10～20分钟。
    
  • 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
    
  • 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm。